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N3503-100 制霉菌素/Nystatin/1400-61-9 【4400U/mg】 常用生化試劑 Sigma
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DiD細(xì)胞膜熒光探針

DiD perchlorate *Oil* [1,1’-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindodicarbocyanine perchlorate]

Biotech Grade

產(chǎn)品規(guī)格       您的價(jià)格

 10mg        680.00

 25mg        1360.00

 100mg       5100.00

特殊規(guī)格       請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

     生化研究專用。DiD染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色，這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散，濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。DiD(紅色熒光)這使得可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行成像和流式分析。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā)，有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)，在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 EX/EM644/663nm

別名：DiD高氯酸鹽

分子量：959.91

CAS： 127274-91-3

使用方法

1. DiD細(xì)胞膜染色液制備

(1)配置DMSO或EtOH 儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用 DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。

注意：未使用的儲(chǔ)存液保存在-20 oC，避免反復(fù)凍融。

(2)工作液制備：用合適的緩沖液(如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS)稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為1～5 μM的工作液。

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　　注意：工作液的終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來(lái)配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找條件。

2. 懸浮細(xì)胞染色

(1)懸浮細(xì)胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。

(2)在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 2～20分鐘，不同的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間不同。

(3)染色細(xì)胞試管在1000～1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。

(4)傾倒上清液，再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。

(5)重復(fù)(3)，(4)步驟兩次以上。

3. 粘壁細(xì)胞的染色

(1)使粘壁的細(xì)胞在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。

(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過(guò)量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。

(4)在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 2～20分鐘，不同的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間不同。

(5)吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。

4. 顯微鏡檢測(cè)

(1)多色染料的同時(shí)檢測(cè)，濾光器按照以下設(shè)定：

　　a) DiI和DiD=Omega XF92，Chroma 51007;

　　b) DiI，DiO和DiD=Omega XF93，Chroma 61005

　5. 流式細(xì)胞儀的檢測(cè)

　　DiD染色的細(xì)胞可以分別用經(jīng)典的FL1流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

保存：-20°C干燥避光保存
有效期：12個(gè)月

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